Waters
WATERS 515 HPLC
4년
주장비
분석
화합물 전처리·분석장비 > 질량분석장비 > 액체크로마토그래피질량분석기
2004-02-25
60,410,964원
고정형
원
특징
정성 및 정량분석 1) 확인법 (가) 머무름(Retention)에 의한 확인법 머무른 시간과 머무른 부피는 주어진 실험조
건에서 용질과 정지상 및 이동상에 따른 특성이므로 용질을 확인하는데 이용할 수 있다. 즉 동일한 HPLC조건에서
미지의 물질과 표준물질을 분석하여 머무른 시간을 비교하는 것이다. 또 다른 방법은 상대적 머무름에 의한 방법
이다. 이것은 분석성분과 표준성 분의 머무른 시간 또는 부피의 비를 말하며 조정된 머무른 시간보다 구하기 편하
고 정확한 값을 준다. 또 한가지 방법은 두가지 이상의 컬럼에 대한 머무름을 표준물질과 함께 비교하는 것이다.
(나) 검출기의 감응에 의한 확인법 일정한 조건에서 두개 이상의 서로 다른 검출기를 사용하여 화합물의 특성 을
비교하는 방법이다. 시료를 한컬럼에서 용출시켜 첫번째 검출기를 통과시키고난 후 제2의 검출기에서 다시 확인하
는 것이다. 그러나 다이오드어레이검출기(diode-array detector)를 사용하는 경우에는 시료성 분의 각 피크에 대
한 특이한 자외선-가시광선 흡수스펙트럼을 확인할 수 있 기 때 문에 제2의 검출기를 사용하지 않고도 확인이 가
능하다. 분석하고자하는 물질이 특이적인 자외선흡수를 하지 않는 경우에는 유도체를 만들어 확인할 수도 있다.
2) 정량법 크로마토그램의 피크로부터 농도를 계산하는 방법은 높이 측정법과 넓이 측정법이 있는데 후자가 보편
적으로 사용되고 있다. (가)내부표준법 이 방법은 상대적 또는 간접적인 방법으로 시료와 표준물질의 농도비를 적
당히 여러개로 만들어 분석하고 피크넓이의 비와 농도비를 이용하여 검량곡선을 만든다 음내부표준물질을 일정량
정확하게 미지시료에 넣은 후 분석을 한다. 넓이의 비를 측정하고 검량선위에서 미지시료와 표준물질의 농도비를
구한다. 일정량의 내 부표준물질을 첨가했으므로 미지물질의 양을 쉽게 계산할 수 있다. 이 방법의 장점은 주입
된 양을 정확히 측정할 필요가 없고 검출기의 반응이 변하더라도 넓이의 비에는 영향을 주지 않는다는 것이다. 이
때 사용되는 내부표준물질 (ITST)은 시료의 어떤 성분과도 잘 분리가 되어야 하며, 시료성분에 포함되어 있지 않
아야 하고 순수한 물질이어야 한다. (나) 외부표준법 순수한 표준품 시료를 정확한 양 주입하여 얻은 피크의 넓이
를 농도에 따라 표시 하여 검량선을 만들고 미지시료를 정확한 양 주입하여 피크넓이를 측정한 후 검량 선으로부
터 시료성분의 양을 계산하는 방법이다. 이 방법은 주입된 시료의 양을 정확히 알아야 하고 검출기의 감도가 분석
할 때마다 다르므로 항상 새로운 검량곡 선을 만들 필요가 있다. (다) 표준물질 첨가법 이 방법은 외부표준법과
내부표준법의 복합이다. 최적조건에서 시료를 분석 하고 난 후 시료에 일정량의 정량할 표준물질을 넣은 후 다시
분석한다. 이들 피 크의 넓이로부터 원하는 성분의 농도를 구할 수 있다.
고정상: 컬럼안에 충진제. column 이란 고정상과 이동상 및 시료의 화학적 친화력에 의한 각각의 단일 성분으로 분리시키는 곳. Normal Phase Functional group의 polarity 분리. non-polar solvent 사용. 극성이 큰물질 나중에 용출됨